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卫生资格《检验主管技师》2017知识点

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  检验科质量手册内容

  质量手册既是实验室质量管理纲领性的文件,其中必须规定有质量管理体系的方针和目标,这一方针和目标须由实验室主任批准并予以声明。

  按IS015189规定,临床实验室的质量手册必须包括下列内容:

  1.实验室可提供的服务范围。

  2.要求与检验活动有关的全体人员熟知质量体系文件并且在任何时候都执行其方针和程序。

  3.实验室关于良好职业规范、检验质量和符合质量管理体系的承诺。

  为此质量手册必须对质量管理体系和质量管理体系文件结构进行描述,以便指导全体员工采纳和应用质量手册、所有引用文件及其实施要求。

  IS015189建议质量手册目录包括的内容有:

  1)引言。

  2)临床实验室的描述,法律地位,资源和主要职责。

  3)质量方针。

  4)人员的教育和培训。

  5)质量保证。

  6)文件控制。

  7)记录、维护和归档。

  8)设施和环境。

  9)设备、试剂和/或相关易耗品的管理。

  10)检验程序的验证。

  虫卵计数法

  虫卵计数法是临床医学检验人员需要了解的知识,整理供检验人员参考如下:

  虫卵计数法是一项用于检查寄生虫的辅助检查方法。虫卵计数用于估计人体内寄生虫的感染度,常用司徒尔(Stoll)氏法,即司氏稀释虫卵计数法。此相检查可以用于判断相应的病征。

  大肠埃希菌

  大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)革兰氏阴性短杆菌,大小0.5×1~3微米。周身鞭毛,能运动,无芽。能发酵多种糖类产酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌。大肠埃希菌的致病物质之一是血浆凝固酶。根据致病性的不同,致泻性大肠埃希菌被分为产肠毒素性大肠埃希菌、肠道侵袭性大肠埃希菌、肠道致病性大肠埃希菌、肠集聚性黏附性大肠埃希菌和肠出血性大肠埃希菌5种。部分埃希菌菌株与婴儿腹泻有关,并可引起成人腹泻或食物中毒的暴发。肠出血性大肠埃希菌O157:H7是导致1996年日本食物中毒暴发的罪魁祸首,它是出血性大肠埃希菌中的致病性血清型,主要侵犯小肠远端和结肠。常见中毒食品为各类熟肉制品、冷荤、牛肉、生牛奶,其次为蛋及蛋制品、乳酪及蔬菜、水果、饮料等食品。中毒原因主要是受污染的食品食用前未经彻底加热。中毒多发生在3、9月。

  志贺菌属的初步鉴定

  挑选可疑菌落3~4个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。将试探性凝集试验阳性的菌落至少接种2~3支KIA和MIU,经35 ℃培养18~24h,凡符合KIA:K/A、产气-/+、H2S-,MIU:动力-、吲哚+/-、尿酶-,并结合试探性玻片凝集试验阳性结果可鉴定为志贺菌属。

  与类志贺邻单胞菌和伤寒沙门菌的鉴别:可用动力和氧化酶试验加以鉴别,志贺菌均为阴性,而类志贺邻单胞菌为阳性。伤寒沙门菌硫化氢和动力阳性,能与沙门菌属因子血清(0多价A-F群或Vi)凝集而不与志贺菌属因子血清凝集。

  巨噬细胞功能检测

  人巨噬细胞可从外周血或经斑蝥激发的皮疱液中获取,也可从肺灌洗液或患者腹膜透析液中分离,但操作繁锁,得量不多。许多实验室在进行基础或配合临床研究巨噬细胞功能及其与疾病的关系、或筛检免疫增强药物和探讨其作用机制时,常选用小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,常用的检测方法如下。

  (一)炭粒廓清试验

  正常小鼠肝中枯否细胞可吞噬清除90%炭粒,脾巨噬细胞约吞噬清除10%炭粒,据此给小鼠定量静脉注射印度墨汁(炭粒悬液),间隔一定时间反复取静脉血,测定血中炭粒的浓度,根据血流中炭粒被廓清的速度,判断巨噬细胞的功能。

  (二)吞噬功能的检测

  巨噬细胞具有较强的吞噬功能,实验室常用比细菌大的细胞性抗原作为被吞噬颗粒,如鸡红细胞。其检测原理是将受检细胞与适量的颗粒抗原混合后,置 37℃保温0.5~1h,其间时加振摇,最后离心取测定细胞制成涂片,染色镜检,分别计数出吞噬百分比和吞噬指数。各实验室应根据自己的条件建立正常参考值。

  (三)巨噬细胞溶酶体酶的测定

  巨噬细胞富含溶酶体酶,如酸性磷酸酶、非特异性酯酶、溶菌酶等,测定这些酶的活性也是衡量巨噬细胞功能的实用指标之一。

  肿瘤标记物

  肿瘤标记物通常指细胞癌变过程中所产生的正常细胞缺乏或含量极微的特异性和相对特异性的物质,也有可能是宿主细胞针对癌细胞所产生的正常细胞成分,但在量和质上与正常状态或良性疾病时明显不同。存在于肿瘤细胞表面、血液或体液中,如肿瘤的 TSTA、TAA、TSA、激素、酶(同功酶)等。

  1.应用

  (1)早期诊断和发现肿瘤。

  (2)提示肿瘤发生的部位和组织来源。

  (3)肿瘤的鉴别诊断。

  (4)肿瘤治疗的疗效观察和预后判断。

  (5)监测肿瘤复发。

  2.要达到上述应用,须具有以下条件

  (1)肿瘤标志物的特异性强。

  (2)肿瘤标志物的诊断灵敏度高。

  (3)肿瘤标志物的产量或血清浓度应与肿瘤组织大小呈正相关。

  肿瘤标志物主要是用于疾病的筛查,而不具有确切的诊断意义。一般来说筛查试验主要用于高危人群,比如,患肝细胞癌的高危人群是指有慢性病毒性肝炎,特别是乙肝和丙肝的患者;前列腺癌的高危人群主要是指60岁以上的老年男性;有肿瘤家族史的健康人也应属于高危人群。

  血清的鉴别方法

  血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。

  在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。

  这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。

  但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。

  血浆组织因子

  【参考范围】30~220μg/L(ELISA法)。

  【影响因素】

  1.最好采用硅化或塑料注射器。玻璃试管等需涂硅处理或使用塑料制品。因为玻璃可以激活凝血反应。

  2.理想的抗凝剂应首选枸橼酸钠。

  3.止血带不应扎得太紧,时间最好不超过5min,并强调采血顺利,以防激活凝血机制。

  【临床意义】

  1.血浆TF水平如果升高可以考虑全身炎症反应,如内毒素作用、严重创伤、休克、ARDS或各种原因引起的DIC.

  2.体内某些活性物质增高,如肿瘤坏死因子、白细胞介素-1、白细胞介素-6大量分泌时,TF水平也会同步升高,且往往呈平行表达,在疾病好转或治疗有效时,水平下降。

  各类树突状细胞

  1.滤泡树突状细胞:FDC定居于淋巴结浅皮质区淋巴滤泡生发中心内。FDC与抗原抗体复合物高度亲合力,能够捕获和滞留抗原,并在记忆B细胞发育中起重要作用,是参与再次免疫应答的APC.

  2.淋巴样树突状细胞:LDC主要分布在淋巴结和脾内,在移植排斥反应中起重要作用。

  3.并指状细胞:IDC主要定位于淋巴组织胸腺依赖区,可能由皮肤Langerhans细胞移行而来。在淋巴组织中,IDC的星状突起插入其它细胞之间,故命名为并指状细胞。它可能是淋巴结中主要的APC,并对抗原特异性T细胞具有很强刺激作用。

  4.朗格罕细胞:LC位于表皮和胃肠上皮,其特征性胞内结构是胞浆中的柱状Birbeck颗粒,该颗粒参与LC抗原呈递作用的各个环节。LC是定居在皮肤中的APC,约占皮肤细胞总数的5%~10%,在介导接触性皮肤超敏反应中起关键作用。

  肿瘤的免疫学诊断

  (一)检测肿瘤抗原

  这是目前最常用的肿瘤免疫学诊断法,如AFP的检测对原发性肝细胞性肝癌有诊断价值,CFA的检测有助于诊断直肠癌、胰腺癌等。但对于人类肿瘤特异性抗原的检测进展不大。

  (二)检测肿瘤抗体

  例如在黑色素瘤患者血清中可查到抗自身黑色素瘤抗体,在鼻咽癌和Burkitt淋巴瘤患者的血清中检测出EB病毒的抗体,且抗体水平的变化与病情的发展和恢复有关。

  (三)肿瘤的放射免疫显像诊断

  将放射性核素如131Ⅰ与抗肿瘤单抗结合后,从静脉注入体内或腔内注射均可将放射性核素导向肿瘤的所在部位,用γ照相机可以显示清晰的肿瘤影像,已用于临床诊断,是一种有较好前景的肿瘤诊断新技术。

  肿瘤患者免疫功能状态评估:

  一般肿瘤病人的免疫功能变化不大,晚期肿瘤病人免疫功能可受抑制,在治疗后免疫功能状态改善,表明治疗方法得当,患者生存期可延长。

  血清β2微球蛋白测定

  微球蛋白(β2m)分子量为ll.8KD的小分子蛋白质,主要由淋巴细胞生成,存在于有核细胞膜上。肿瘤细胞合成β2m的能力很强。血中的β2m可自由通过肾小球,几乎全部(99.9%)在近曲小管(PCT)重吸收,经小管上皮细胞吞饮作用进入细胞内,被溶酶体消化分解为氨基酸供机体再利用,由尿排出者仅占0.1%.

  测定方法:β2m测定过去以RIA法为主,80年代以后有EIA法、免疫浊度分析等方法。

  禁饮试验的影响因素

  【影响因素】禁饮试验可鉴别尿崩症与精神性多饮,但不能鉴别中枢性尿崩症与肾性尿崩症,可加做加压素试验将二者区分开来。

  【临床意义】

  1.正常人限制饮水后,VP分泌和释放将增加,可促进远端肾小管和集合管对水的重吸收增加以减少尿量,其尿渗透压和比重将增高,血渗透压降低。

  2,禁水5h后尿量无明显减少,尿比重亦无明显上升,且连续2次尿比重相同,体重下降3%以上,可初步诊断为尿崩症。若尿量明显减少,尿比重明显上升,体重下降不明显,应考虑为精神性多饮。如进一步明确诊断,可延长禁水时间至12~16h.

  凝胶层析知识

  凝胶层析又称分子筛过滤或排阻层析等。固定相是多孔凝胶,各组分的分子大小不同,因而在凝胶上受阻滞的程度也不同。

  本法的优点是所用凝胶属于惰性载体,吸附力弱,操作条件温和,不需要有机溶剂,对高分子物质有很好的分离效果。

  常用的凝胶有Sephadex G系列。凝胶层析可用于脱盐、分离提纯、测定高分子物质的分子量、高分子溶液的浓缩等。

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