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2018年主管药师考试基础知识辅导(十)

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2018-02-11 11:37

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  2018年主管药师考试基础知识辅导(十)

  (一)核酸的紫外吸收

  在核酸分子中,由于嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键体系,因而具有独特的紫外线吸收光谱,一般在 260nm左右有最大吸收峰,可以作为核酸及其组份定性和定量测定的依据。

  (二)核酸的变性、复性与杂交

  1.核酸的变性

  (1)核酸的变性:在理化因素作用下, 核酸分子中的氢键断裂,双螺旋结构松散分开,形成无规则单链结构的过程。变性核酸将失去其部分或全部的生物活性。核酸的变性并不涉及磷酸二酯键的断裂,其一级结构(碱基顺序)保持不变。

  A型题:

  DNA变性的原因是( )

  A.3’,5’磷酸二酯键的断裂

  B.二硫键的断裂

  C.互补碱基之间氢键断裂

  D.碱基甲基化修饰

  E.多核苷酸链解聚

  『正确答案』C

  『答案解析』DNA变性是指在某些理化因素的作用下,互补的碱基对间的氢键断裂。

  (2)DNA变性后,它的一系列性质也随之发生变化:

  ①增(高)色效应:天然状态的DNA在完全变性后,紫外吸收(260nm)值升高,即增色效应。

  ②Tm值: 随DNA变性增加,260nm处的紫外光吸收值逐渐增加,该值达到最大值50%时的温度称为核酸的解链温度或融解温度,用“Tm”表示。

  Tm值影响因素: GC含量,GC含量越高,Tm值越大;核酸分子量,核酸分子量越大,Tm值也越大。

  A型题:

  DNA的解链温度指的是( )

  A.A260nm达到最大值时的温度

  B.A260nm达到最大值时的50%时的温度

  C.DNA开始解链时所需要的温度

  D.DNA完全解链时所需要的温度

  E.A280nm达到最大值50%时的温度

  『正确答案』B

  『答案解析』DNA的变性从开始解链到完全解链,是在一个相当窄的温度范围内完成的,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时温度称为DNA的解链温度。

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