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2018年检验技师考试复习笔记(五)
尿液化学成分检查项目之一
尿液蛋白为尿液化学成分检查中最重要的项目之一。正常人的肾小球滤液中存在小分子量的蛋质，在双月刊牢牢曲小管时绝大部分又被重吸收，因此终尿中的蛋白质含量很少，仅为30-130mg/24h.随机一次尿中蛋白质为0.80mg/L.尿蛋折定性试验呈阴性反应。
当尿液中蛋白质超过正常范围时称为蛋白尿，含量大于0.1g/L时定试验可阳性。正常时分子量在7万以上的蛋白质不能通过肾小球滤过膜，而分子量1-3万的低分子蛋白质虽大多可通过滤过膜，但又为近曲小管重吸收，由于肾小管细胞分泌的蛋白如TammHorsfall蛋白(T-H蛋白)、SigA等以及下尿路分泌的粘液蛋白可进入尿中。
尿蛋白质 2/3来自血浆蛋白，其中白蛋白约占40%其余为小分子量的酶(溶菌酶等、)肽类、激素类先进，如将正常人尿液浓缩后再经免疫电泳，可按蛋白质的分子量量大小分成以下3组：
①高分子量蛋白质：分子量大于9万，含量极微，包括由肾髓袢升支极及远曲小管上皮细胞分泌的T-H糖蛋白及分泌型IGA等;
②中分子量蛋白质：分子量4-9万，是以白蛋白为主的血浆蛋白，可占尿蛋月总数的1/2-2/3;③低分子量蛋白质：分子量小于4万，绝大多数已在肾小管重吸收。因此尿中含量极少，如免疫球蛋白FC片段，游离轻链、α1微球蛋白、β2微球蛋白等。
荧光色素
许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有：
1.异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate，FITC)为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为 389.4，最大吸收光波长为490——495nm，最大发射光波长520——530nm，呈现明亮的黄绿色荧光，结构式如下：有两种同分异结构，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性、与蛋白质结合能力等方面都更好，在冷暗干燥处可保存多年，是应用最广泛的荧光素。其主要优点是：①人眼对黄绿色较为敏感，②通常切片标本中的绿色荧光少于红色。
2.四乙基罗丹明(rhodamine，RIB200)为橘红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮。性质稳定，可长期保存。结构式如下：最大吸收光波长为570nm，最大发射光波长为595～600nm，呈橘红色荧光。
3.四甲基异硫氰酸罗丹明(tetramethylrhodamineisothiocyanate，TRITC)结构式如下：最大吸引光波长为 550nm，最大发射光波长为620nm，呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合，但荧光效率较低。
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